冷胁迫是影响力农经济作物产销量的主要环镜挑战性的一种。钙根据性蛋清激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）信号灯传接到细胞系并激发对磨难异常的重要的自动调节细胞，但其房产调控逻辑尚不清除。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷酸性反应呈现位点检查服务。

用英语一级标题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

繁体中文副标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

雇主企业单位：浙江大学

设计村料：番茄

拜谱展示水平：磷硝化作用绘制位点测量

研究方案总体目标：

一、探索最后

1、CPK27在常温胁迫下表达爱上浮，得以促进茎叶耐寒性性

已往理论研究分析一下说明，CPK27在冷胁迫生活条件下表达方法方式上涨。为认可这一种成果，小编中我便用CPK27的两根敲除变动系（cpk27 #2，#6）使用抗冻性测验，出现CPK27的转录标准更为明显高与对应组（图1a-b）。在CPK27表达方法方式被减退的值物中，对抗冻性的资料做用更为明显减退。进1步的亚人体体细胞分析一下与促活理论研究分析一下说明，冷胁迫提高CPK27向人体体细胞质日常积累，并资料其磷硝化意义标准（图1 f）。免疫力印记分析一下进1步显示冷胁迫分析 CPK27 在核内蛋清丰度加入、胞内丰度变少，外源CaCl₂进行处理可部件恢复正常cpk27的冷敏感度表型，说明CPK27信任Ca²⁺4g信号产生做用。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺忽略方法增进番茄耐旱性

2、CPK27能够宏观调控黄胺类获得路线缓减温度拉伤

转录组测序数据表明，CPK27的过表示方式有关系数调整黄胺类动物获得有关DNA，如CHS、CHI和FLS等，并且黄胺类排泄信号通路有关系数丰度。而CPK27转变体中这DNA表示方式调低，警告CPK27依据促使黄胺类获得的帮助主茎可以缓解低溫胁迫产生的氧化的有压力（图2a-e）。

图2 RNA-seq深入分析CPK27宏观调控的冷反应染色体

3、HY5是CPK27介导的抗寒信号灯通道中的要点靶标

为揭示 CPK27 与 HY5 的上下级使用，笔者第第一步去了酵母粉双有性杂交（Y2H）實驗，报告单揭示这两种的出现上下级使用（图3a）。双大分子荧光互为依存（BiFC）實驗进第一步揭示CPK27 与 HY5 在神经元核内造成上下级使用（图 3b）。随后不久借助免役共凝固等技木，得知HY5与CPK27在绿植的内部的出现上下级使用，且这两种的上下级使用有着钙化合物（Ca²⁺）依赖于性（图 3c）。不仅如此，在Co-IP實驗的蛋清抽取前施用冷胁迫操作，报告单显现冷胁迫可资料HY5与CPK27的上下级使用（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷硝化作用其最为关键的位点

4、CPK27磷硝化作用HY5减弱其转录渗透性，带动黄胺类DNA把你想表达出来

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷过酸绘制位点检验，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷碱化HY5并明显增强其稳固性

5、CPK27 在类黄酮生物技术人工通道中效果于HY5的中下游

综合性基因遗传表答和分解代谢物浅析后果（图5），CPK27在冷胁迫积极响应的过程 中帮助于HY5的上下游，利用国家宏观调控 HY5 介导的类黄酮海洋生物炼制径路影晌苔藓植物耐旱性。

图5 CPK27效应于HY5上中下游

二、文章标题总结

由此可见经验，本论文实验说明CPK27磷硝化作用体现HY5球蛋白，刺激类黄酮自动合成路经，迫使防老化的物日常积累，行而加强耐旱学习能力。该实验体现了了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调空共识机制（图6），验证CPK27介导的HY5磷硝化作用是相连接钙数字信号与次生排泄防御力的关键点的环节，为解读树种顺境反映电脑网络可以提供了新焦距。

图6 CPK27-HY5电源模块不断提高草本花卉耐受性冷胁迫的共识机制

三、拜谱总结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的蛋清质组学、绘制蛋清质组学、排泄组学、转录组学等两组学类产品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

参考价值文章：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134